原發(fā)性免疫缺陷病 的檢查：

血清免疫球蛋白E（IgE） 淋巴細胞計數(shù) 血清免疫球蛋白（Ig） 血清免疫球蛋白M（IgM） 血小板相關(guān)免疫球蛋白（PAIgG、PAIgA、PAIgM） 全血細胞計數(shù) 紅細胞花環(huán)試驗 血常規(guī) 血清免疫球蛋白A（IgA） 血清免疫球蛋白G（IgG） 血清免疫球蛋白D（IgD）

對所有免疫缺陷病例，必須選作一些實驗室檢查以確立診斷;而在作相應(yīng)治療之前，通常還須作一些先進試驗對疾病作進一步分類(表147-5)。一般來說，多數(shù)機構(gòu)和醫(yī)院能作篩查試驗，多數(shù)大醫(yī)院能作先進試驗，特殊試驗則只有一些實驗室或配備高水平免疫學(xué)實驗室的醫(yī)院才能進行。
當(dāng)懷疑免疫缺陷時，建議進行實驗室篩查試驗，包括全部血細胞計數(shù)及分類計數(shù)和血小板計數(shù);測定IgG，IgM和IgA濃度;抗體功能測定;感染的臨床和實驗室判斷。
血細胞計數(shù)可發(fā)現(xiàn)貧血，血小板減少，中性粒細胞減少或白細胞增多。應(yīng)計數(shù)淋巴細胞總數(shù)，如有淋巴細胞減少(<1500/μl)，提示T細胞免疫缺陷的可能。需作外周血涂片檢查是否有紅細胞染色質(zhì)小體(Howell-Jolly)和其他異常紅細胞，若有提示無脾癥或脾功能不良。粒細胞可顯示異常形態(tài)(如出現(xiàn)Chédiak-Higashi綜合征的顆粒)。
免疫球蛋白濃度測定也屬于最先篩查的項目之一，但IgD和IgE濃度最初不測。對于免疫球蛋白的解釋需謹慎從事，因為有顯著的年齡性差異;以成人的標(biāo)準(zhǔn)，所有2~6個月的嬰兒均有低γ球蛋白血癥。因此免疫球蛋白濃度必須與同年齡對照組的正常濃度相比較。一般免疫球蛋白濃度在同年齡2SD(標(biāo)準(zhǔn)差)范圍內(nèi)為正常?？偯庖咔虻鞍诐舛?IgG+IgM+IgA)>600mg/dl，或IgG>400mg/dl同時抗體功能試驗正常者，可排除抗體缺陷?？偯庖咔虻鞍诐舛?lt;200mg/dl常表示明顯的抗體缺陷。濃度中度降低(如IgG濃度在200~400mg/dl之間或總免疫球蛋白在400~600mg/dl)沒有診斷意義，需聯(lián)系抗體功能試驗。
抗體篩查試驗也被推薦用于初篩。用同種凝集素滴度(抗A和/或抗B)估計IgM抗體功能。除<6個月嬰兒和AB血型者外，其他所有的人均有1:8(抗A)或1:4(抗B)或更高的天然抗體滴度。在某些免疫缺陷(如Wiskott-Aldrich綜合征，IgG2缺陷)天然抗體和對某些細菌多糖類抗體有選擇性缺陷。對免疫過的患者，可測定對B型流感菌，乙型肝炎病毒，風(fēng)疹病毒，破傷風(fēng)或白喉抗原的抗體滴度以估計IgG功能。出現(xiàn)對一種或幾種抗原的適度抗體反應(yīng)，表明無抗體缺陷。最后，篩查應(yīng)包括對慢性感染的檢查。紅細胞沉降率增加通常與感染程度相一致。應(yīng)作相應(yīng)的X線檢查(胸部，鼻竇)和細菌培養(yǎng)。
若所有這些篩查試驗均正常，則免疫缺陷(特別是抗體缺陷)可排除。但若證實有慢性感染，病史毫無疑問或篩查試驗陽性，則必須進一步作高級試驗檢查。
B細胞(抗體)缺陷的試驗　只要總免疫球蛋白很低(<200mg/dl)，就可確立抗體缺陷的診斷，其他一些試驗僅用于確定具體的疾病和檢定有無其他免疫缺陷。如免疫球蛋白濃度和既存抗體滴度低但尚未到消失程度，則需測定對一種或多種標(biāo)準(zhǔn)化抗原的抗體反應(yīng)。對破傷風(fēng)類毒素，B型流感疫苗(測對蛋白質(zhì)抗原的反應(yīng)性)或肺炎球菌，腦膜炎球菌疫苗(測對多糖抗原的反應(yīng)性)，在免疫前和免疫后3~4周測定抗體滴度，以了解接種后反應(yīng)。如出現(xiàn)異常反應(yīng)(滴度升高低于4倍)，則不論免疫球蛋白濃度如何，提示有抗體缺陷。
若總免疫球蛋白較低，可用熒光抗B細胞特異抗體(如CD19，CD20)經(jīng)流式細胞儀來計算B細胞。正常外周血中淋巴細胞的10%~20%為膜表面免疫球蛋白陽性細胞(B細胞)。
其次，進行血清IgG亞類，IgD和IgE濃度測定。IgG1亞類濃度(與IgG相似)與年齡明顯有關(guān)，通常在2歲后，IgG1<250mg/dl，IgG2<50mg/dl，IgG3<25mg/dl或IgG4測不出可診斷IgG亞類缺陷。在不完全抗體缺陷綜合征時常見IgD和IgE異常(兩者濃度均降低或升高)。IgE增高見于趨化性疾病，部分T細胞缺陷，變應(yīng)性疾病和寄生蟲病。IgG4或IgE單獨缺少無臨床意義。
某些情況需作其他B細胞缺陷的試驗(表147-5)。在淋巴結(jié)病時或者為了除外惡性腫瘤或感染時，可作淋巴結(jié)活檢(有時需先免疫鄰近的肢體)。IgG濃度正?；蚪咏６锌贵w功能缺陷時，需作IgG亞類分析。可能存在4個亞類中某一亞類的選擇性缺陷。如懷疑有IgG分解加速或經(jīng)皮膚或胃腸道丟失時，則作IgG壽命檢查;如病人IgG濃度低下，可靜脈給予大劑量免疫球蛋白，然后每日測定IgG濃度以確定其半衰期。若有嚴重感染，可測分泌物(淚液或唾液)中的免疫球蛋白濃度。還可體外檢測IgG合成以及對特異抗原如噬菌體或鑰孔血藍蛋白的抗體反應(yīng)來確定抗體合成阻斷的確切部位。在一些遺傳缺陷的疾病，經(jīng)用特殊的實驗室試驗?zāi)馨l(fā)現(xiàn)突變的基因或突變的基因產(chǎn)物(如在X連鎖無γ球蛋白血癥所證實的Bruton酪氨酸激酶基因)
T細胞缺陷的試驗　持久而極度嚴重的淋巴細胞減少提示T細胞缺陷。然而淋巴細胞減少并不常見。胸部X線檢查是篩查嬰兒T細胞缺陷的有用方法。對新生兒特別是在感染或其他能使胸腺變小的應(yīng)激狀況發(fā)作前作X線檢查，如看不到胸腺影像，提示有T細胞缺陷。
遲發(fā)型皮膚超敏反應(yīng)試驗對2歲以上兒童是有價值的篩查T細胞缺陷的試驗?？捎靡韵碌目乖毫餍行匀傺卓乖钪榫乖?1:100)，液體破傷風(fēng)類毒素(1:10)和毛癬菌抗原。幾乎所有成人以及大多數(shù)免疫嬰兒和兒童會對其中一種或幾種抗原發(fā)生反應(yīng)，于48小時出現(xiàn)直徑>5mm的紅斑和硬結(jié)。存在一個或一個以上陽性遲發(fā)型皮膚試驗通常表明T細胞系統(tǒng)未受損。
診斷細胞免疫最有價值的先進試驗是T細胞和T細胞亞群(輔助/誘導(dǎo)細胞和抑制/細胞毒細胞)的計數(shù)。通常采用T細胞特異性的鼠單克隆抗體經(jīng)流式細胞儀作檢測。應(yīng)用全T細胞抗體(抗CD3，抗CD2)檢測總T細胞，抗CD4抗體檢測T輔助/誘導(dǎo)細胞，抗CD8抗體檢測T抑制/細胞毒細胞(這些試驗已替代羊紅細胞花結(jié)法計數(shù)T細胞)。當(dāng)輔助T細胞(CD4)計數(shù)<500細胞/μl，高度提示T細胞免疫缺陷。CD4計數(shù)<200細胞/μl，則為重度T細胞免疫缺陷。CD4/CD8(輔助/抑制)細胞比值應(yīng)>1。0。此比值倒置也提示T細胞免疫缺陷(在艾滋病CD4/CD8比值降低表示免疫系統(tǒng)進行性受損)。單克隆抗體也能有效地檢測激活的細胞(CD25)，自然殺傷細胞(CD16和CD56)和不成熟的T細胞胸腺細胞)抗原(CD1)。
測量病人淋巴細胞增殖和增大(轉(zhuǎn)化)能力的另一種有效的先進試驗是將有絲分裂原(如植物血凝素，刀豆素A)，照射過的同種白細胞(用于混和白細胞反應(yīng))或病人過去接觸過的抗原，與淋巴細胞共同培養(yǎng)。在這些刺激之下，正常淋巴細胞急速分裂，這可用形態(tài)學(xué)方法或?qū)⒎派湫孕叵汆奏饺敕至鸭毎姆椒ㄓ枰詼y定。增殖程度通常用指數(shù)表示---受刺激細胞的每分鐘計數(shù)(CPM)與等量未受刺激細胞的每分鐘計數(shù)的比值。T細胞缺陷病人存在與免疫受損程度一致的增殖應(yīng)答低下甚至消失的現(xiàn)象。對有絲分裂原(能激活所有細胞)的增殖反應(yīng)(刺激指數(shù)50~100)明顯地高于對抗原或同種細胞的反應(yīng)(刺激指數(shù)3~30)。
還可進行特殊試驗測定在有絲分裂原或抗原刺激后淋巴因子的生成。淋巴因子有30多種，但通常測定γ-干擾素(IFN-γ)和白介素-2(IL-2)，白介素-4(IL-4)和α-腫瘤壞死因子。部分病人有相應(yīng)的增殖反應(yīng)，但淋巴因子生成低下[如慢性粘膜皮膚念珠菌病時的移行抑制因子(MIF)缺陷]。另一組特殊試驗可測定細胞毒功能。使用不同的腫瘤細胞或病毒感染的靶細胞測定不同類型的細胞毒(自然殺傷細胞，抗體依賴性細胞毒或細胞毒性T細胞)。細胞免疫缺陷可有不同的細胞毒缺損。在某些類型的聯(lián)合免疫缺陷，嘌呤代謝途徑的一些酶(腺苷酸脫氨酶，核苷磷酸化酶)有缺陷，可用紅細胞測定。最后，還可測定不同的胸腺激素(胸腺素，血清胸腺因子)，這些激素在某些細胞免疫缺陷時有所減少。HLA分型能有效地檢出二群細胞(嵌合體)的存在，也可排除HLA抗原的缺陷(裸淋巴細胞綜合征)。
在少數(shù)T細胞激活缺陷病可通過T細胞受體完整性和信號傳導(dǎo)途徑的判斷加以確定。
吞噬細胞缺陷的試驗　當(dāng)病人有確切的免疫缺陷病史而B細胞和T細胞免疫正常時，需檢查有無吞噬細胞障礙。炎癥部位無膿液形成或臍索脫落延遲，同時又無白細胞減少，這種臨床現(xiàn)象提示存在趨化性缺陷。
初篩除血細胞計數(shù)外，還應(yīng)測定IgE濃度(在許多趨化障礙時IgE會增高)和四唑氮藍(NBT)還原試驗用以診斷最常見的吞噬細胞缺陷---慢性肉芽腫病。NBT試驗的原理是，粒細胞在進行吞噬和殺傷時其代謝活性增高，使無色的NBT還原形成藍色的甲。慢性肉芽腫病時此種染色變化不出現(xiàn)，可用肉眼，顯微鏡或分光光度儀判定。
特殊試驗中，首先做粒細胞染色以測定髓過氧化物酶，堿性磷酸酶或酯酶。如這些酶染色試驗陰性，則需接著做定量測定。其次，細胞運動可用Rebuck皮膚窗檢測。方法是，用解剖刀將皮膚表層刮傷，放一塊蓋玻片于其上，然后每隔一定時間更換蓋玻片，做移動細胞染色。多形核細胞應(yīng)在2小時內(nèi)首先大量進入，至24小時內(nèi)為單核細胞所代替。趨化性異?？捎皿w外趨化性試驗測定。此法系在特制的趨化性小室(Boyden小室)或瓊脂糖平板上觀察粒細胞或單核細胞的移動，測定細胞朝向趨化性吸引物(如經(jīng)調(diào)理素處理過的酵母多糖)的移動能力。
其次，吞噬作用還可通過計數(shù)分離的粒細胞或單核細胞吞噬膠乳粒子或細菌的情況作檢測，然后測定殺菌作用。方法是在新鮮血清中將病人的粒細胞與已知量活菌混合，然后在2小時內(nèi)系列定量細菌數(shù)目。
其他確定吞噬細胞缺陷的特殊試驗包括：給予皮質(zhì)類固醇，腎上腺素或內(nèi)毒素　測定粒細胞動員作用;粒細胞酶定量測定(髓過氧化物酶，6-磷酸葡萄糖脫氫酶等);粒細胞氧化產(chǎn)物測定(過氧化氫，超氧化物);粒細胞特異蛋白測定[CR3(CD11)，粘附糖蛋白磷酸煙酰胺腺嘌呤二核苷酸成分]，后者能區(qū)分4種遺傳類型的慢性肉芽腫型別。
補體缺陷的試驗　補體異常的篩查是測定血清總補體活性(CH50)以及血清C3，C4濃度。發(fā)現(xiàn)其中任何一種濃度低下時，必須接著做經(jīng)典途徑和替代途徑的補體滴定，和各個補體成分的測定。經(jīng)典途徑成分的缺陷與免疫腎臟疾患，血清錫克反應(yīng)或急性感染有關(guān)。作補體成分測定需用單價特異性抗血清或致敏紅細胞以及含有待測成分外所有補體成分的溶液。
還可用抗血清測定補體調(diào)控蛋白;遺傳性血管性水腫多伴有C1抑制物缺陷，C3分解代謝過盛的C3缺陷伴有Ⅰ因子(C3抑制物)缺陷。測定血清調(diào)理活性，趨化活性或殺菌活性可作為判斷補體功能的間接試驗。